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乙酰丁香酮的作用原理和配制方法
发布时间:2020-08-20 点击次数:563次
  乙酰丁香酮是一种酚类化学物,分子式是HOC6H2(OCH3)2COCH3。 类白色或浅褐色粉末或结晶,溶于CH2Cl2 ,参考浓度25mg/ml或2.5%。可诱导脓杆菌Vir基因的活化,从而促进外源基因的整合。作用机理是通过诱导农杆菌Vir区基因的活化与表达,促进T-DNA的加工与转移,从而促使农杆菌T-DNA更容易进入植物基因组并与其整合。
  乙酰丁香酮作用原理:
  可诱导农杆菌Vir基因活化,从而促进外源基因的整合。所以最好让其有一定的诱导时间再转化,效果要好些,而不是加完后直接转化(需要活化)。
  As作为诱导性最好的酚类化合物,其作用机理主要是通过诱导农杆菌Vir区基因的活化与表达,促进T-DNA的加工与转移,从而使农杆菌T-DNA更易进入植物基因组并与其整合。农杆菌Ti或Ri质粒的Vir区编码产物负责接收外界信号、T-DNA的加工、转移及整合等功能,对菌种的侵染力起决定性的作用。农杆菌在生长培养基中培养繁殖时,所有的Vir区基因均处于非转录活性状态,这些基因接受As等信号分子后便开始转录活化。
  乙酰丁香酮的配制方法:
  1,用于拟南芥花侵染的,配制使用的容积为DMSO,母液为100mM,使用浓度请参照相关文献。
  2,另外一种是用于愈伤组织的侵染,是用少量甲醇溶解后,再用蒸馏水定容。之后过滤除菌。显然两者溶剂不一样,不过建议还是使用DMSO。
  乙酰丁香酮使用方法:
  一般使用终浓度为100-200 umol/L。可用DMSO溶解,配置1M母液,分装-20度保存。转化前,将乙酰丁香酮加入转化缓冲液,冰上放置约1 h后即可使用。
  贮存条件:密封室温保存。

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