欧冠联赛下注app

当前位置:
欧冠联赛下注app > 新闻资讯 > ELISA试剂盒实验中要注意哪些细节要点呢?
目录导航 Directory
新闻资讯News
ELISA试剂盒实验中要注意哪些细节要点呢?
发布时间:2020-04-21 点击次数:873次
   使用ELISA试剂盒进行试验时,应分别以阳性对照与阴性对照控制试验条件,待检样品应作一式二份,以保证实验结果的准确性。有时本底较高,说明有非特异性反应。
  在ELISA中,进行各项实验条件的选择是很重要的,其中包括:
  固相载体的选择:许多物质可作为固相载体,如聚氯乙烯、聚苯乙烯、聚丙酰胺和纤维素等。其形式可以是凹孔平板、试管、珠粒等。目前常用的是40孔聚苯乙烯凹孔板。不管何种载体,在使用前均可进行筛选:用等量抗原包被,在同一实验条件下进行反应,观察其显色反应是否均一性,据此判明其吸附性能是否良好。
  包被抗体(或抗原)的选择:将抗体(或抗原)吸附在固相载体表面时,要求纯度要好,吸附时一般要求PH在9.0~9.6之间。吸附温度,时间及其蛋白量也有一定影响,一般多采用4℃18~24小时。蛋白质包被的适浓度需进行滴定:即用不同的蛋白质浓度(0.1、1.0和10μg/ml等)进行包被后,在其它试验条件相同时,观察阳性标本的OD值。选择OD值大而蛋白量少的浓度。对于多数蛋白质来说通常为1~10μg/ml。
  为了确保实验的成功,ELISA试剂盒实验中需留心下列的细节
  1、严格按照规定的时刻和温度进行温育以保证成果。一切试剂都必须在运用前到达室温20-25℃。运用后当即冷藏保存试剂。
  2、洗板不正确能够导致不的成果。在加入底物前确保尽量吸干孔内液体。温育过程中不要让微孔枯燥掉。
  3、消除板底残留的液体和手指印,否则影响OD值。
  4、底物显色液应呈无色或很浅的色彩,现已变蓝的底物液不能运用。
  5、防止试剂和标本的穿插污染以免形成错误成果。
  6、在储存和温育时防止强光直接照射。
  7、平衡至室温后再打开密封袋以防水滴凝聚在冷板条上。
  8、任何反响试剂不能触摸漂白溶剂或漂白溶剂所散发的强烈气体。任何漂白成分都会损坏试剂盒中反响试剂的生物活性。
  9、不能运用过期产品。
  10、假如可能传播疾病,一切的样品都应管理好,按照规定的程序处理样品和检测设备。

联系人
在线客服
用心服务成就您我
扫一扫访问手机站
访问手机站